A12 - Charakterisierung von Protein A-spezifischen DNA-Aptameren mittels SPR
- Event
- 11. Dresdner Sensor-Symposium 2013
2013-12-09 - 2013-12-11
Dreikönigskirche - Haus der Kirche Dresden - Chapter
- 1. Biosensorik und Point of Care
- Author(s)
- V. Tröger - TU Dresden/D, B. Strehlitz, R. Stoltenburg - Helmholtz-Zentrum für Umweltforschung (UFZ), Leipzig/D, S. Schmieder, F. Sonntag - Fraunhofer IWS, Dresden/D
- Pages
- 178 - 182
- DOI
- 10.5162/11dss2013/A12
- ISBN
- 978-3-9813484-5-3
- Price
- free
Abstract
In dieser Arbeit wird die Kombination des neuen DNA-Aptamers für Protein A (PA#2/8) mit dem etablierten liSPR-Messsystem vorgestellt. Dazu wurde eine universelle Methode zur spezifischen Aptamer-Funktionalisierung auf SPR-Chips mittels Nanospotting-Technologie charakterisiert und optimiert. Mit dieser konnte durch SPR-basierte Interaktionsstudien gezeigt werden, dass das DNAAptamer PA#2/8 zwischen Protein A als seinem spezifischen Zielmolekül und dem verwandten Immunglobulin-bindenden Protein G unterscheidet. Des Weiteren wurde anhand einer Konzentrationsreihe eine Nachweisgrenze von 100 nM und ein Detektionsmaximum von 100 μM Protein A ermittelt. Die Spezifität des Aptamers PA#2/8 für Protein A konnte durch SPR-Messungen mit den Proteinen BSA, Casein und humanem Thrombin gezeigt werden, welche zu keinem unspezifischen Bindungssignal führten. Damit konnte erfolgreich ein Assay zur Charakterisierung von Protein A-spezifischen DNA-Aptameren etabliert werden.